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QIAGEN Proteinase K (10 ml)蛋白酶K 分子生物試劑

  • 更新時間:  2023-07-27
  • 產品型號:  19133
  • 簡單描述
  • QIAGEN Proteinase K (10 ml)蛋白酶K
    QIAGEN蛋白酶K

    用于DNA和RNA制備過程中的蛋白酶消化
    QIAGEN蛋白酶和QIAGEN蛋白酶K在廣泛的反應條件下具有高活性的廣泛底物特異性
詳細介紹

QIAGEN Proteinase K (10 ml)蛋白酶K

QIAGEN蛋白酶K

用于DNA和RNA制備過程中的蛋白酶消化

QIAGEN蛋白酶和QIAGEN蛋白酶K在廣泛的反應條件下具有高活性的廣泛底物特異性。兩種蛋白酶均在大多數DNA和RNA分離程序中常用的緩沖液中提供高活性,并且由QIAGEN保證質量。

QIAGEN蛋白酶是一種從重組芽孢桿菌菌株中分離的silu suan蛋白酶,是蛋白酶K的經濟替代品,可從多種來源分離天然DNA和RNA。QIAGEN蛋白酶*不含DNase和RNase活性。

QIAGEN蛋白酶K是一種枯草桿菌蛋白酶型蛋白酶,從腐生真菌Tritirachium album中分離出來,特別適用于短消化時間。它具有很高的比活性,可以在很寬的溫度和pH值范圍內保持穩定,而在較高溫度下的活性大大提高。可溶性鈣對于酶活性不是必需的。這意味著用于抑制Mg 2 +依賴性酶(如核酸酶)的EDTA 不會抑制蛋白酶K的活性。



QIAGEN Proteinase K (10 ml)蛋白酶K

性能

QIAGEN Protease和QIAGEN Proteinase K在大部分DNA和RNA純化流程使用的緩沖液以及寬范圍的鹽、變性劑、洗滌劑、pH和溫度條件下都有高活性(見表“常用緩沖液中的蛋白酶活性")。

常用緩沖液中的蛋白酶活性*
緩沖液活性(%)
QIAGEN

Protease

QIAGEN

Proteinase K

30 mM Tris·Cl100100
30 mM Tris·Cl; 30 mM EDTA; 5% Tween 20; 0.5% Triton X-100; 800 mM GuHCl?210313
36 mM Tris·Cl; 36 mM EDTA; 5% Tween 20; 0.36% Triton X-100; 735 mM GuHCl?205301
10 mM Tris·Cl; 25 mM EDTA; 100 mM NaCl; 0.5% SDS78128
10 mM Tris·Cl; 100 mM EDTA; 20 mM NaCl; 1% Sarkosyl10174
10 mM Tris·Cl; 50 mM KCl; 1.5 mM MgCl2; 0.45% Tween 20; 0.5% Triton X-100159106
10 mM Tris·Cl; 100 mM EDTA; 0.5% SDS98120
30 mM Tris·Cl; 10 mM EDTA; 1% SDS38203
* pH 8.0, 50°C, 1.25 µg/ml蛋白酶,孵育15 min。
?  QIAGEN Genomic-tip操作流程中使用的Buffer G2,用于從血液、細胞培養基和組織中純化DNA。
? 用于細菌DNA純化的QIAGEN Genomic-tip實驗方案中推薦的蛋白酶消化緩沖液條件(Buffers B1+ B2)。
原理
技術規格

QIAGEN ProteaseQIAGEN Proteinase K
規格凍干粉即用型溶液
7.5 AU或4 x 7.5 AU2 ml或10 ml (20 mg/ml)
活性45 mAU/mg蛋白>600 mAU/ml
單位定義一個mAU是指每分鐘1 molluo an suan釋放的斐林陽性的氨基酸和肽的活性

QIAGEN Proteinase K是從腐生菌Tritirachium album中提取的一種枯草桿菌蛋白酶,非常適合短時間消化。其特異性活性高,在很大的溫度和pH 值范圍內可保持穩定,并在高溫時具有更高活性。可溶性鈣在酶反應中不是必須的。所以用于抑制核酸酶等Mg2+依賴性酶的EDTA將不會抑制Proteinase K的活性。以下QIAGEN試劑盒中包含有Proteinase K:


    QIAGEN Protease是從重組Bacillus菌株中提取的一種蛋白酶,可替代Proteinase K從多種樣本中提取DNA和RNA,且價格較低。QIAGEN Protease沒有DNase 和RNase活性。以下QIAGEN試劑盒中包含有QIAGEN Protease:


  • 注意:使用手動QIAamp DNA Blood Kit和QIAGEN Blood & Cell Culture DNA Kit的用戶應該用7 ml蒸餾水重懸每個瓶中的QIAGEN Protease。

  • 注意:使用QIAamp DNA Blood BioRobot 9604 Kit的用戶應該用10 ml蒸餾水重懸每個瓶中的QIAGEN Protease。



  • 注意:QIAGEN蛋白酶不可與DNeasy Tissue、DNeasy 96 Tissue及QIAamp DNA Mini Kit中的ATL緩沖液同時使用。在SDS濃度大于0.5%、肌氨酰濃度大于1%、或有高濃度的其他去污劑時,EDTA的濃度必須小于8 mM,這樣才能在延長的孵育時間內達到an quan活性。

操作流程

QIAGEN Protease或QIAGEN Proteinase K的使用指南在相應的試劑盒手冊中提供。

應用

QIAGEN Protease和QIAGEN Proteinase K用于DNA和RNA制備過程中蛋白酶的消化。在設計蛋白酶消化時,應考慮兩種酶之間的細微差異。





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